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肠道微生物检测,肠道菌群基因检测

  • 生物
  • 2024-07-24

肠道微生物检测?肠道菌群,人体肠道的正常微生物,如双歧杆菌,乳酸杆菌等能合成多种人体生长发育必须的维生素,如B族维生素(维生素B1、B2、B6、B12),维生素K,烟酸、泛酸等,还能利用蛋白质残渣合成必需氨基酸,如天冬门氨酸、苯丙氨酸、缬氨酸和苏氨酸等,并参与糖类和蛋白质的代谢,同时还能促进铁、镁、那么,肠道微生物检测?一起来了解一下吧。

肠道微生物检测有啥意义

大肠埃希氏菌(Escherichia coli)通常被称为大肠杆菌,是Escherich在1885年发现的,在相当长的一段时间内,一直被当作正常肠道菌群的组成部分,认为是非致病菌。直到20世纪中叶,才认识到一些特殊血清型的大肠杆菌对人和动物有病原性,尤其对婴儿和幼畜(禽),常引起严重腹泻和败血症,它是一种普通的原核生物,根据不同的生物学特性将致病性大肠杆菌分为6类:肠致病性大肠杆菌(EPEC)、肠产毒性大肠杆菌(ETEC)、肠侵袭性大肠杆菌(EIEC)、肠出血性大肠杆菌(EHEC)、肠黏附性大肠杆菌(EAEC)和弥散粘附性大肠杆菌(DAEC).。大肠杆菌属于革兰氏阴性细菌(G-)。

细菌的分离鉴定

1、标本:肠道外感染取中段尿、血液、脓液、脑脊液等,腹泻者取粪便。

2、分离培养与鉴定:粪便标本直接接种肠道杆菌选择性培养基。血液需先经肉汤增菌,再转种血琼脂平板。其他标本可同时接种血琼脂平板和肠道杆菌选择性培养基。37℃孵育18~24小时后,观察菌落并涂片染色镜检。采用一系列生化反应进行鉴定。肠致病性大肠杆菌须先作血清学定型试验。必要时检定肠霉毒素。

泌尿系统除确定大肠杆菌外,还应计数,每毫升尿含菌量≥100,000时,才有诊断价值。

肠道菌群研究方法

1、血液标本,在病程的1-2周采集,但只要发热持续,两周后依然可以采血检测。

2、粪便标本,在病程的3-4周采集,取3g新鲜粪便或肛拭进行微生物检测。

3、骨髓标本,全病程均可采集。

肠道微生物如何验证

肠道菌群,也称为肠道微生物群,是指生活在人体肠道中的大量细菌构成的集体 。它们并不是与生俱来的,而是从出生后开始逐渐在肠道中定植并形成稳定的菌群构成。肠道菌群的构成复杂,细菌种类繁多,可以大致分为三种类型:共生菌群、条件致病菌群和致病菌群 。共生菌群主要包括拟杆菌、梭菌、双歧杆菌、乳酸杆菌等,它们与人体形成良好的合作关系,辅助消化多种食物,并保护我们的肠道 。

肠道菌群与人体健康息息相关,它们不仅帮助我们消化食物,还参与合成维生素、调节免疫系统、影响神经内分泌等多种生理活动 。近年来,随着研究的深入,人们发现肠道菌群与营养不良、肥胖症、糖尿病等疾病也存在关联 。此外,肠道菌群还与自闭症、心血管疾病、肝病等有着潜在的联系。

现在,人们越来越重视肠道菌群检测,这是因为肠道菌群的平衡对于维持宿主的代谢健康至关重要。紊乱的肠道菌群可能会导致多种常见代谢病的发生,包括肥胖、2型糖尿病、非酒精性肝病等 。通过检测肠道菌群,可以帮助了解个体的肠道健康状况,评估疾病风险及亚健康状况,为个性化的饮食和生活方式调整提供依据 。

希胞生物的肠道菌群检测方法包括但不限于16S rRNA基因测序、宏基因组测序等,这些技术能够帮助识别和定量肠道中的不同微生物种类 。

菌落总数测定方法

一、细菌的分离鉴定

1、标本:肠道外感染取中段尿、血液、脓液、脑脊液等,腹泻者取粪便。

2、分离培养与鉴定:粪便标本直接接种肠道杆菌选择性培养基。血液需先经肉汤增菌,再转种血琼脂平板。其他标本可同时接种血琼脂平板和肠道杆菌选择性培养基。

37℃孵育18~24小时后,观察菌落并涂片染色镜检。采用一系列生化反应进行鉴定。肠致病性大肠杆菌须先作血清学定型试验。必要时检定肠霉毒素。

泌尿系统除确定大肠杆菌外,还应计数,每毫升尿含菌量≥100,000时,才有诊断价值。

二、卫生细菌学检查

大肠杆菌不断随粪便排出体外,污染周围环境和水源、食品等。取样检查时,样品中大肠杆菌越多,表示样品被粪便污染越严重,也表明样品中存在肠道致病菌的可能性越大。故应对饮水、食品、饮料进行卫生细菌学检查。

1、细菌总数:检测每毫升或每克样品中所含细菌数,采用倾注培养计算。中国规定的卫生标准是每毫升饮水中细菌总数不得超过100个。

2、大肠菌数指数:指每立升中大肠菌群数,采用乳糖发酵法检测。中国的卫生标准是每1000ml饮水中不得超过3个大肠菌群;瓶装汽水、果汁等每100ml大肠菌群不得超过5个。

三、全自动微生物定量分析仪(TEMPO)检测

全自动微生物定量分析(TEMPO)仪的大肠杆菌群计数检测有TC和CC两种方法。

大便菌群分析

肠热症(伤寒病症)是伤寒病和副伤寒病的总称,主要由伤寒杆菌和甲、乙、丙型副伤寒杆菌引起,也有侵袭性非伤寒沙门菌(iNTS)可致伤寒。

该类菌种主要从临床分离,食品、环境、非哺乳类动物等较少能分离获得。食品养殖动物(如禽畜类)也会有伤寒(如鸡伤寒鸡白痢等)病症,但宿主仅限于动物。

该类菌种鉴定是在有临床病症的病人样品中分离到菌株,种属确认至沙门氏菌属后,进行血清学分型,如果是伤寒、甲乙丙副伤寒这四类可直接确认,如果是非伤寒沙门菌,一定要结合样品来源确认,一般iNTS的判定标准和病人样品来源直接相关,本应无菌的非肠道来源组织或器官,多为血液、骨关节、脑脊液等。

以上就是肠道微生物检测的全部内容,大肠菌群系指一群能发酵乳糖、产酸产气、需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽胞杆菌。该菌主要来于人畜粪便,故以此作为粪便污染指标来评价食品的卫生质量,推断食品中有否污染肠道致病菌的可能。食品中大肠菌群数系以100mL(g)检样内大肠菌群最可能数(MPN)表示。1 设备和材料 1.1 温箱:36±1℃。

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