下列是生物学技术制备抗体？抗体是由效应B细胞分泌，参与体液免疫．（2）效应B细胞与骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞，即能分泌特异性抗体，又能无限繁殖，进而产生单克隆抗体．（3）③至⑥流程属于转基因技术，原理是基因工程．过程⑤基因表达载体的构建需要限制性内切酶和DNA连接酶．V1基因体外扩增的技术为（聚合酶链式反应），那么，下列是生物学技术制备抗体？一起来了解一下吧。
（1）多克隆抗体的制备。
①免疫方法：对多克隆抗体，免疫方法一般有皮下或肌肉免疫法、皮内免疫法、淋巴结免疫法和混合法等。一般来说，皮下或肌肉免疫法产生的抗体比较多；皮内免疫法所需的抗原量少，在抗原宝贵时特别适用，但与之相对的，它产生的抗体量也不多。混合免疫法的优点是抗原用量小，产生抗体速度快。
②多克隆抗体的制备：将抗原免疫动物（常用的动物为兔、羊、狗等），分离出抗血清并纯化抗体。多克隆抗体的均一性较差，其特异性相对较低，因此，多克隆抗体在农药残留速测技术中的应用受到一定的限制。但近年来有学者恰恰利用了多抗的交叉反应高的特点，通过制备出具有某类（或某几种）农药的“共性结构”的半抗原或者通过制备出含多个抗原决定簇的人工抗原来制备“宽谱特异性”抗体，进行农药多残留分析研究。
（2）单克隆抗体的制备。单克隆抗体制备技术最初是由K鰄ler和Milstein（1975）利用B淋巴细胞杂交瘤技术创立的。目前该技术已广泛应用于疾病诊断及生物、医学研究、环境和食品安全检测（监测）等方面。单抗均一性高，只和抗原某一决定簇结合，有更高的特异性，而且，产生抗体的单克隆细胞可在体外传代繁殖，不受动物免疫时间限制生产抗体。
【答案】B
【答案解析】试题分析：
PCR技术用于扩增核酸，不能用来扩增蛋白质；杂交瘤技术用于制备单克隆抗体；电子显微镜用于观察叶绿体的基粒的亚显微结构，光学显微镜用于观察叶绿体的外部形态；花粉离体培养用于培育单倍体植物。
考点：考查PCR技术，杂交瘤技术，显微镜的使用，花粉离体培养。
点评：难度较小，熟记技术的应用。
Ⅰ（1）制备单克隆抗体的过程涉及到动物细胞融合和动物细胞培养两个过程，在进行动物细胞培养时，要将动物组织剪碎，用胰蛋白酶处理，使其分散成单个细胞，制备成细胞悬液．
（2）诱导融合的细胞有三种，已免疫B细胞的自身融合细胞、骨髓瘤细胞的自身融合细胞、杂交瘤细胞；A细胞的特点是无限增殖和产生特定抗体，经选择性培养的杂交瘤细胞，还需进行克隆化培养和抗体检测，经多次筛选就可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞，进行体内或体外培养．
（3）单克隆抗体的优点具有特异性强，灵敏度高，可在体外大量生产．
Ⅱ（1）从母牛体内获得的卵母细胞需要培养到减数第二次分裂中期才能与精子受精．
（2）Ⅱ过程优质奶牛的培育过程需要进行胚胎移植，受体对移入子宫的外来胚胎基本上不发生免疫排斥反应．
（3）对Ⅱ中囊胚进行胚胎分割移植（或胚胎分割），获得多头与此优质奶牛相同的小牛，注意将囊胚的内细胞团进行均等分割．否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育．
（4）通过显微注射的生长激素基因等方法导入哺乳动物的受精卵中．若要检测该受精卵细胞内是否含有基因X，在分子水平上通常用荧光标记作探针．
故答案为：
Ⅰ（1）动物细胞融合胰蛋白酶
（2）无限增殖和产生特定抗体克隆化培养
（3）特异性强，灵敏度高
Ⅱ（1）减数第二次分裂中期
（2）受体对移入子宫的外来胚胎基本上不发生免疫排斥反应
（3）胚胎分割移植注意将囊胚的内细胞进行均等分割
（4）显微注射荧光标记的生长激素基因
Ⅰ、（1）向健康人体注射特定抗原，提取出A浆细胞（效应B淋巴细胞），在人体参与体液免疫．
（2）过程①至②抗体的获取称为单克隆抗体，其中①是细胞融合过程，Y细胞称为杂交瘤细胞．
Ⅱ、（1）SmaⅠ识别的序列为GGGCCC，切割会产生平末端；图1中DNA片段含有两个SmaⅠ识别位点，第一个识别位点在左端534 bp序列向右三个碱基对的位置；第二个识别位点在右端658bp序列向左三个碱基的位置，从而两个位点切割后产生的DNA片段的长度分布为534+3，796-3-3，658+3，即得到的DNA片段长度为537、790、661．
（2）在杂合子体内含有基因D和基因d，基因D的序列中含有两个识别位点，经过SmaI完全切割会产生537bp、790bp和661bp三种不同长度的片段，基因d的序列中含有一个识别位点，经过切割后会产生1327bp和661bp两种长度的片段，综上，杂合子中分离到该基因的DNA片段经过切割后会产生4种不同长度的片段．
（3）能够获取目的基因并切开质粒的限制酶有识别序列为GGATCC的BamH I和识别序列为GATC的MboI，若使用Mbo I会同时破坏质粒中的抗生素A抗性基因和抗生素B抗性基因，所以要用BamH I来切割目的基因和质粒，切割后保留了完整的抗生素B抗性基因，便于筛选出含有重组质粒的大肠杆菌．因为目的基因和运载体是用同种限制酶切割的，目的基因两端的末端和质粒切割后的两个末端都能进行互补，可能出现目的基因反向连接在运载体上的情况，导致基因D不能正确表达．
故答案为：
Ⅰ、（1）、浆细胞（效应B淋巴细胞）体液
（2）、单克隆抗体细胞融合杂交瘤细胞
Ⅱ、（1）、537、790、661（写全给分）
（2）、4
（3）、BamHⅠ
抗体制备技术对比，杂交瘤与噬菌体展示
杂交瘤技术，源自体细胞融合，由克勒与米尔斯坦于1975年发现。这项技术通过将骨髓瘤细胞与免疫动物的脾细胞融合，生成能分泌特异性高纯度单克隆抗体的细胞。在免疫组化和多种细胞生物学技术中，杂交瘤技术发挥着核心作用。然而，它的长制备过程及对完整抗原表位识别的不足，限制了它的应用。
噬菌体展示技术，运用噬菌体外壳蛋白随机重组抗体重链可变区和轻链可变区基因，感染大肠杆菌。噬菌体繁殖、组装并分泌至培养基中，结合抗原的噬菌体可被分离、扩增及纯化。这种方法能简便快速筛选大量克隆。在基因工程重组技术支持下，噬菌体展示技术在高端抗体应用领域成果显著。
总体而言，噬菌体展示技术在技术要求上较高。义翘神州历经多年探索与积累，自主建设噬菌体抗体库技术生产平台，熟练掌握鼠单抗、兔单抗制备技术。相比人工免疫与杂交瘤技术，噬菌体展示技术避开了细胞不稳定性问题，方法简单高效，便于大规模发酵生产，筛选容量大，数周内可筛选百万至亿个克隆。它模拟体内免疫过程与天然全套抗体库，可任意克隆抗原抗体，展示出广泛的应用潜力。
噬菌体展示技术发展势头强劲，其价值不仅限于抗体制备，已广泛应用于免疫学、细胞生物学、药理学与蛋白质工程。
以上就是下列是生物学技术制备抗体的全部内容，【答案解析】试题分析：PCR技术用于扩增核酸，不能用来扩增蛋白质；杂交瘤技术用于制备单克隆抗体；电子显微镜用于观察叶绿体的基粒的亚显微结构，光学显微镜用于观察叶绿体的外部形态；花粉离体培养用于培育单倍体植物。考点：考查PCR技术，杂交瘤技术，显微镜的使用，花粉离体培养。点评：难度较小，内容来源于互联网，信息真伪需自行辨别。如有侵权请联系删除。
