目录生物素修饰抗体 biotin生物素标记抗体原理 生物素化检测抗体 biotin生物素标记抗体 生物素抗体标记
如果是同公司同货号的抗体,差异就是在生物素上,生物素化的抗体是在一扮郑抗哗缺薯上偶联了生物素,这样可以乱者在下游检测时通过亲和素放大一抗的信号强度,而未生物素化的抗体,需要二抗用anti特异种属的来进行信号放大。
商品化抗体一般都是生物素标轮橘记的
在做western blot或免疫组化时我们常使用一抗二抗来放大、显示抗原,用酶或荧光标记二抗.生物素化的抗体,是在抗体上连接生物素(biotin),生物素能和亲和素(avitin)特异性高亲和性结陵空合,亲和力是抗原抗体结合的一万倍,而且一个avitin可以结合四个biotin,这样又起到级联放大的作用.所以能更加灵腊汪团敏的显示微量抗原.这种方法也叫亲和免疫组化.
主要表现在以下几个方唯知面。
1放射免疫测定中的应用
BAS主要与免疫放射分析(IRMA)检测体系偶联,用于对终反应的放大(BA法):先将针对不同抗原决定簇的固相抗体和生物素化抗体与抗原(标准抗原和待测抗体)同时反应,在固相载体表面形成双抗体夹心免疫复合物;再租州加入125I标记的亲和素(或链霉亲和素)与复合物中的生物素结合,最终使反应信号放大,进一步提高IRMA的灵敏度。如该用于测定促甲状腺激素(TSH)时,由于方法的高灵敏性,即可将甲亢患者降低的TSH水平与正常值低限有效地予以区别。此外,BAS也可用于IRMA反应后B、F成分的分离:先将生物素化的McAb和放射性核素标记的McAb与抗原的不同抗原决定簇结合,反应平衡后,加入表面偶联有亲和素的聚苯乙烯珠与免疫复合物中的生物素连接成固相终产物。该法的优点是克服了其他指型消IRMA法需多次离心的麻烦.待测复合物与固相结合更牢固,操作更简便。
2在分子生物学中的应用
BAS在分子生物学领域中的应用日渐增多,目前主要集中在以生物素标记核酸探针进行的定位检测,用BAS制备的亲和吸附剂进行基因的分离纯化以及将免疫测定技术与PCR结合建立免疫—PCR(immuno-PCR)用于抗原的检测等三方面。
【铅嫌差答案】:D
ABC为亲和素-生物素化酶复合物技术;LAB为者信标记亲和素-生物素槐皮的方法;直接法为生物素化第一抗体;间接法BAS为生物素化第二抗体。
可以。和其他抗体的保存方法一样。生物素非常稳定,而且大纳一旦标记到抗体上后就不会脱落。所桐册以只要按照普通抗体的保存方法保存就可以了。
生物素只有在长时间暴露局仿宏在紫外下才会分解,其他时候都非常稳定的。