微生物菌种鉴定?【答案】:对于一株未知的细菌,首先要用经典鉴定指标进行鉴定,包括形态、生理生化反应、生态特性、生活史、血清学反应以及对噬菌体的敏感性等。接着需要用现代的微生物学鉴定技术包括(G+C)mol%值法、核酸分子杂交法、那么,微生物菌种鉴定?一起来了解一下吧。
注射用水微生物超标要做菌种鉴定
传统方法细菌做革兰氏染色 运动性试验 各种代谢 然后查伯杰氏细菌手册;用分子做的话提总DNA,pcr扩增16srDNA全长片段,上NCBI数据库比对,选择近缘序列构建发育树鉴定。
真菌的话主要根据形余郑态,特别是有性型生殖形态鉴定;分子的话一般扩增ITS区域,比对,建树鉴定。
首先你要确定待鉴定的菌种一定是纯种 。如果菌种不纯,所观察到的现象则是混合现象,这样自然不会得到正确的结果。因此在鉴定之前,首先要将菌种纯化。 纯化方法,一般有2种:平板划线单菌落分离法和单细胞分离法。前一种操作简便,效果良好,适用范围广。
菌种鉴定的方法一般有常规鉴定和分子生物学方法:
(1)常规鉴定:菌落形态观察、革兰氏染色、菌毛染色、糖类分解实验、吲哚实验、淀粉水解实验、V-P实验、甲宽吵基红实验、柠檬酸盐利用实验、硝酸盐还原实验、接触酶实验等
(2)分子生物学方法:细菌16SrDNA菌种鉴定:提取DNA,特定引物PCR扩增,PCR产物纯化测序,进化树竖巧颂分析;真菌18S rDNA/ITS菌种鉴定流程也是一样的。
“+”代表阳性;“-”代表阴性。跟医院里的诊断结果一个意思
"G+"代表革兰氏阳简仔燃性;"G-"代表革兰氏阴性戚仔。
是两组不同的概拦虚念,要区分概念。
实验步骤:菌种鉴定工作是各类微生物学实验室都经常遇到的基础性工作。不论鉴定对象属哪一类,其工作步骤都离不开以下三步:①获得该微生物的纯种培养物;②测定一系例必要的鉴定指标;③查找权威性的鉴定手册。一、经典分类鉴定方法 群体:菌落形态,在半固体或液体培养基中的生长状态等
* 形态个体:细胞形态,染色反应,各种特殊构造等
*营养要求:能源,碳源,氮源,生长因子等
*生理、生化反应酶;产酶种类和反应物性等
* 代谢产物:种橡灶类,产量,显色哗如如反应等
* 经典指标 生态特性:生长温度,对氧的需要,宿主种类等
* 生活史特点
* 血清学反应
* 噬菌体的敏感性
* 其它
经典分类法
经典分类法是一百多年来进行微生物分类的传统方法。其特点是人为地选择几种形态生理生化特征进行分类,并在分类中将表型特征分为主、次。一般在科以上分类单位以形态特征、科以下分类单位以形态结合生理生化特征加以区分。 * A. 能在 60 o C 以上生长
* B. 细胞大,宽度 1.3~1.8mm ………………… 1. 热微菌属 ( Thermomicrobium )
* B. 细胞小,宽度 0.4~0.8mm
* C. 能以葡萄糖为碳源生长
* D. 能在 pH4.5 生长 …………………………… 2. 热酸菌属 ( Acidothermus )
* DD. 不能在 pH4.5 生长 …………………………………… 3. 栖热菌属 ( Thermus )
* CC. 不能以葡萄糖为唯一碳源 ……………… 4. 栖热嗜油菌属 ( 栖热嗜狮菌属 Thermoleophilum )
* AA. 不能在 60 o C 以上生长
二、现代分类鉴定方法
* 近年来,随着分子生物学的发展和各项新技术的广泛应用,促使微生物分类鉴定工作有了飞速发展。
首先如果你的菌株是自然界中分离得到,就只能鉴定到种,不能鉴定到株,因为多多少少和其他株系的细菌有区别,即便你做了一些特征的鉴定,发现和某一株细菌一模一样,你也没有理由说你的细菌就是那一株细菌,因为你不可能把所有的特征槐源都做完,株和株之间的关系就相当于不同的人之间的关系,世界上不可能有完全相同的两个人。除非你知道你的细菌本来就是某一株细菌扩增出来的(而且要保证没有变异,否则就是一个新株),可是这样就没必要鉴定了搏明扰。
菌种鉴定一般就只要提取基因组DNA,然后PCR扩增16srDNA片段,上GeneBank或者Eztaxon对比即可。一般序列相似度在97%以上就可以认为是同种细菌(当然也有例外,DNA序列仅仅基旦是一个参考指标)。
【答案】:对于一株未知的细菌,首先要用经典鉴定指标进行鉴定,包括形态、生理生化反应、生态特性、生活史、血清学反应以及对噬菌体的敏感性等。接着需要用现代的微生物学鉴定技术包括(G+C)mol%值法、核酸分子杂交法、16SrRNA寡核苷酸测序技术等手段对其进行分基没析,最终确定手物该细菌属于毕锋液哪个种。
以上就是微生物菌种鉴定的全部内容,实验步骤:菌种鉴定工作是各类微生物学实验室都经常遇到的基础性工作。不论鉴定对象属哪一类,其工作步骤都离不开以下三步:①获得该微生物的纯种培养物;②测定一系例必要的鉴定指标;③查找权威性的鉴定手册。 一、。