生物质谱?【答案】:是通过测定生物样品离子的质荷比(m/z)来进行成分和结构分析的分析方法。生物质谱技术可以使核酸或蛋白质、多肽等生物大分子产生带单电荷或多电荷的分子、离子,从而能够测定其分子量。那么,生物质谱?一起来了解一下吧。
这个难度有点大啊,质谱的书籍有N多,简单的说两句
质谱是带电粒子按质荷比大小顺序排列的图谱.最初主要用来测定元素或同位素的原子量.随着科学的发展及高性能质谱仪器的出现,质谱被越来越多地应用于生命科学研究的许多领域,以基质辅助激光信答解吸附飞行时间质谱(MALDITOF)和电喷雾质谱(ESI)为代表的现代生物质谱技术,为蛋白质等生物大埋坦告分子的研究提供了必要的弯明技术手段.
现在质谱的发展非常的快,你这个问题主要是要解决什么?
【答案】:是通过测定生物样品离子的质荷比(m/z)来进行成分和结构分析的分析瞎档衡方法。生物质谱技术可以使核酸或蛋白质、多肽等生物磨做大分子产生带单电荷或多电荷的分子蠢丛、离子,从而能够测定其分子量。
hait等发展一种称为宏旦宽“protein ladder sequencing”的方法,通过对Edman降解法的修改,产生一系列截去N端残基的肽段,用MALDI-MS测得这些肽段的质量,从而推测N端序列。Patterson等利用羧肽酶Y酶解法并结合MALDI-TOF MS质量分析法迟迅同样测得了C端得肽序列。Mann等用串联质谱技术分析肽段可得到这样的信息:N端段质量、C端段质量和中蔽亮间少数几个残基的序列,称为“肽序列标记”(peptide sequence tag,PST),并认为这样的标记比部分肽序列信息在查库时更具限制性。
质谱技术的基本原理是样品分子离子化后,根据不同离子间的荷质比(芦游燃m/e)的差异来分离并确定分子量。其原理并不新鲜,但是在80年代早期出现的两种新的离子化技术,使质谱从仅能分析小分子挥发物质到可以研究生武打分子,80年代末又发明了两种更新的离子化技术,一种是介质辅助的激光解吸/离子化(matrix-assisted laser desorption/ionization,MALDI),另一种是电喷雾离子化(electrospray ionization,ESI)。这些技术能快速而极为准确地测定生物大分子的分子量;在结合各种新的质谱分析技术,便可以在各种水平上研究蛋白质,为蛋白质研究开辟了新的道路,是蛋白质组研究从蛋白质深入到高级结构研究,以及各种蛋白质之间的相互作用研究。
另外,对于蛋白质和多肽,质谱的发展还有一个重要的用途是肽的测序。这是采用串联质谱(Tandem-MS),即在第一级质谱得到肽的分子离子,选取目标肽的离子作为母离子,与惰性气体碰撞,使肽链中的肽键断裂,形成一系列离子,即N端碎片离子系列(B系列)和C端碎片离子系列(陪虚Y系磨答列),将这些碎片离子系列综合分析,可得出肽段的氨基酸序列。
目前商业化的生物质谱仪,其离子化方式主要是电喷雾电离与基质辅助激光解吸电离,前者常采用四极杆质量分析器,所构成的仪器称为电喷雾(四极杆)质谱仪(ESI-MS),后者常用飞行时间作为质量分析器,所构成的仪器称为基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱仪(MALDI-TOF-MS)。ESI-MS的特点之一是可以和液相色谱、毛细管电泳等现代化的分离手段联用,从而大大扩展了其在生命科学领域的应用范围,包括药物代谢、临床和法医学的应用等;MALDI-TOF-MS的特点是对盐和添加物的耐受能力高,且测样速度快,操作简单。此外,可用于生物大分子测定的质陵举凯谱仪还有离子阱(ion trap,IT)质谱和傅里叶变换离子回旋共振(Fourier transform ion cyclotron resonance,FTICR)质谱等尺唤。而最近面市的答带最新型的生物质谱仪是液相色谱-电喷雾-四极杆飞行时间串联质谱仪(LC-ESI-MS-MS)与带有串联质谱功能的MALDI-TOF质谱仪,前者是在传统的电喷雾质谱仪的基础上采用飞行时间质量分析器代替四极杆质量分析器,大大提高了仪器的分辨率、灵敏度和质量范围,其商品名有Q-TOF和Q-STAR等;后者是在质谱中加入了源后降解(post-source decay,PSD)模式或碰撞诱导解离(collisionally induced dissociation,CID)模式,从而使生物大分子的测序成为可能。
以上就是生物质谱的全部内容,对分离的蛋白质 进行鉴定是蛋白质组研究的重要内容,蛋白质微量测序、氨基酸组成分析等传统的蛋白质鉴定技术不能满足高通量和高效率的要求,生物质谱技术是蛋白质组学(Proteomics)的另一支撑技术。