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2016-07-29 20:57来源:生物学霸点击次数:143
在基础医学与生物学研究领域中,基因干预越来越重要,方法也越来越多。如何实现细胞和动物水平上的基因高表达或抑制,我们需要精准、高效的基因转染方法。
目前动物体内基因转染方式,广义上来说有两种:
1、基因工程小鼠
基因工程小鼠,是经典的动物体内基因干预模型,包括转基因小鼠(TG mouse,transgenetic mouse),敲除小鼠(KO mouse,Konckout mouse),敲入小鼠(KI mouse,Knockin mouse)。
基因工程小鼠对生物医药研究发挥了巨大的作用,但也存在不少的限制因素:
(1)从受精卵开始的基因干预,经过长时间发育的复杂代偿,所表现出来的功能表型和实际的基因功能表型可能存在巨大的偏差。2015 年 8 月份,nature 杂志发表了 Didier Stainier 研究小组发现受精卵敲除 egfl7 基因和成年后用 RNA 干扰阻断 egfl7 的表达,模式生物所得到的表型完全不一样。
(2)基因工程小鼠周期长,成本高。君忆否,动物房里伺候老鼠,一把屎一把尿拉扯它,给它找对象,还得帮它养孩子。(哭死)
2、病毒载体介导的动物体内基因转染
目前最主流的病毒载体有三种:腺病毒(adenovirus),慢病毒(lentivirus),腺相关病毒(AAV,adenovirus associated virus)。
国内慢病毒包装有使用过BIODAI的自主研发的假病毒纯化,纯度高,无外源未包裹DNA或RNA物质污染; 病毒样颗碧槐粒无传染性,不会对实验人员造成伤害,因此生伍搏物安全性好; 滴度高腔慧祥,每毫升可达106拷贝;稳定性好,-20℃保存6个月以上RNA不降解。
In readily transfected cells treated with potent and effective siRNAs such as the new AmbionSilencer Select siRNAs, near-maximal silencing can be achieved for 5–7 days.赛默飞他们siRNA干扰持续大概一个星期左右。要看裂腊你的具体的干扰的细胞,干猛颂扰效果等情况。但是,肆知滑肯定是很短的。建议;重新干扰。--汉恒生物
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