生物素标记试剂盒?产品介绍:超级生物素快速标记试剂盒为用户提供全面的生物素标记解决方案,适用于蛋白、抗体、多肽等大分子的伯氨基(NH2-)标记。产品特点:1. 优化的生物素连接臂设计,减少空间位阻,适用于细胞表面标记。2. 简单的操作流程,无需额外试剂准备。3. 短时间完成标记过程,仅需90分钟。那么,生物素标记试剂盒?一起来了解一下吧。
ChIRP试剂盒是一种用于研究哺乳动物细胞或组织中lncRNA、circRNA、蛋白与DNA相互作用的实验工具。其原理是通过设计与目标RNA序列互补的生物素探针,将目标RNA与与其共同作用的DNA染色体片段吸附到链霉亲和素磁珠上,然后通过qRT-PCR、测序、Western或质谱分析测定目标RNA、DNA序列或蛋白。该方法在全基因范围内定位lncRNA/circRNA结合位点,揭示其在细胞核内的生物学机制。试剂盒内含高特异性和灵敏度的优化试剂,可降低非特异性背景,提高实验成功率。适用于研究lncRNA与DNA、RNA及蛋白质之间的互作,不受lncRNA长度限制,同样适用于circRNA的互作研究。产品特点包括体内互作研究、结果可靠、优化的缓冲液和方案、短反应时间、多功能性及产物适合多种下游实验。请在收到试剂盒后,按标签上的温度储存部件,组件在装运之日起6个月内保持稳定。广州如期生物技术有限公司专注于生命科学、转化医学,提供实验试剂耗材、技术服务、实验数据处理及figure制作服务。
EMSA实验用于检测蛋白质与DNA或RNA的结合情况,揭示它们在细胞内外的相互作用机制。随着技术发展,EMSA实验的应用范围扩大,不仅限于蛋白质与DNA结合的分析,还扩展到了蛋白质与RNA结合的研究,如碧云天推出的化学发光法RNA EMSA试剂盒。实验原理基于DNA或RNA与蛋白质复合物在聚丙烯酰胺凝胶电泳中迁移率不同,通过标记核酸探针,观察蛋白质是否与其结合产生“滞后”条带,进而推断细胞内是否发生相似的结合反应。实验通常设置包括阴性对照、常规反应、探针冷竞争反应、突变探针的冷竞争反应及super-shift反应等分组,以验证探针的特异性及探知结合蛋白的身份。
EMSA实验在科学研究中扮演重要角色,案例一中,中国科学院青岛生物能源与过程研究所的吕雪峰、朱涛等人与德国佛莱堡大学合作,通过碧云天化学发光法EMSA试剂盒(GS009)及BeyoECL Plus (超敏ECL化学发光试剂盒)(P0018)对cyanobacterium Anabaena sp基因组中的MerR型转录调节因子Alr3614及其同源物进行研究,为CAST系统工作模式的认知及基因编辑工具的开发提供了新思路。案例二中,中国农业大学刘金华及宁夏大学魏凡华共同通讯在Nature Microbiology杂志上发表的研究成果,通过碧云天EMSA探针生物素标记试剂盒(GS008)成功对目标DNA进行了标记,研究证明了DNA感应器IFI16对IFN-I的增强产生以抑制甲型流感病毒复制。
产品介绍:超级生物素快速标记试剂盒为用户提供全面的生物素标记解决方案,适用于蛋白、抗体、多肽等大分子的伯氨基(NH2-)标记。
产品特点:
1. 优化的生物素连接臂设计,减少空间位阻,适用于细胞表面标记。
2. 简单的操作流程,无需额外试剂准备。
3. 短时间完成标记过程,仅需90分钟。
4. 离心脱盐去除游离生物素,无需透析或凝胶过滤。
标记计算:标记量取决于待标记物的浓度和分子量。例如,针对2mg/ml的IgG(150KD),使用生物素和抗体的分子比为20:1,可实现最佳效果。其他蛋白根据实际情况参照此比例进行。
计算公式:V(µL) = (V1(mL) * C1(mg/mL) * R) / M / C(mM)
实验前准备:
1. 阅读使用说明书。
2. 计算所需生物素量,参照计算公式。
3. 将试剂盒置于室温20分钟。
4. 将生物素配制为10mM浓度。
操作步骤(标记1mg抗体为例):
1. 在超滤管中加入待标记抗体,使用标记缓冲液稀释至2mg/mL,12,000g离心10分钟,重复直至浓度稳定。
2. 加入活性超级生物素,混匀后37℃避光温育30分钟。
3. 12,000g离心10分钟。
4. 使用标记缓冲液调整浓度,重复离心。
答案
普通DNA Marker可以被生物素或DIG标记,但需要使用相应的化学试剂盒进行标记。其中,生物素和DIG均是常用于核酸检测的标记物质。
解释
例如,对于生物素标记,可使用生物素-蛋白A(Biotin-Protein A)复合物或生物素-11-UTP等试剂盒进行DNA标记;对于DIG标记,则可使用DIG-11-dUTP或DIG-11-dUTP+DNA Pol I等试剂盒进行标记。标记完成后,将DNA Marker与探针(如荧光素探针或辣根过氧化物酶亚硫酸酯探针)结合,即可进行核酸检测。需要注意的是,在进行DNA标记时,应根据实验设计和需求选择合适的标记物质及试剂盒,并严格按照说明书操作。
抗生物素蛋白链菌素 为什么用这个标记
该试剂盒是一种时间分辨的荧光共振能量转移免疫分析,该反应是一个竞争免疫反应,即铕标的cAMP示踪复合物与体系中的cAMP竞争结合标有Alexa Fluor 647染料的cAMP抗体。铕标cAMP示踪复合物是通过Biotin标记的cAMP与铕标的抗生物素蛋白链菌素(streptavidin)与抗体的复合物紧密结合产生的。
当抗体结合到示踪剂上时,340nm的激发光激发铕标分子,导致能量转移到Alexa Fluor 647染料上,结果产生665nm的发射光。荧光的强度与样品中的cAMP含量成反比。
本试剂盒用于检测在GPCR激动剂刺激下活细胞或者细胞膜制备品产生的cAMP。对于偶联Gαs的受体,激动剂刺激导致665nm的荧光强度降低,而拮抗剂则可以逆转这一效应;对于偶联Gαi的受体,在激动剂刺激的同时用forskolin刺激cAMP产生,那么激动剂则抑制forskolin诱导的cAMP的生成,因此对照只给forskolin的细胞组可以通过665nm荧光强度的增加反应激动剂的效应。
该试剂盒的灵敏度很高,室温下反应在20h内是稳定的。本试剂盒适用于在384孔板中进行24μl的微量分析。
以上就是生物素标记试剂盒的全部内容,答案普通DNA Marker可以被生物素或DIG标记,但需要使用相应的化学试剂盒进行标记。其中,生物素和DIG均是常用于核酸检测的标记物质。解释例如,对于生物素标记,可使用生物素-蛋白A(Biotin-Protein A)复合物或生物素-11-UTP等试剂盒进行DNA标记;对于DIG标记。