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化学发光免疫分析原理,化学发光免疫检测原理

  • 化学
  • 2023-05-09
目录
  • 化学发光免疫分析优缺点
  • 化学发光分析仪检测原理
  • 化学发光免疫技术的基本原理
  • 化学发光检测原理及流程
  • 生物发光免疫分析原理

  • 化学发光免疫分析优缺点

    化学发光免疫分析仪是通过检测患者血清从而对人体进行免疫分析的医学检验仪器。将定量的患者血清和辣根过氧化物(HRP)加入到固相包被有抗体的白色不透明微孔板中,血清中的待测分子与辣根过氧化物酶的结合物和固相载体上的抗体特异性结合。分离洗涤未反应的游离成分。然后,加入鲁米诺Luminol发光底液 ,利用化学反应释放的自由能激发中间体,从基态回到激发态,能量以光子的形式释放。此时,将微孔板置入分析仪内,通过仪器内部的三维传动,依次由光子计数明皮器读出各孔的光子数。样品中的待唤差测分子浓度根据标准品和槐皮建立的数学模型进行定量分析。最后,打印数据报告,以辅助临床诊断。

    化学发光分析仪检测原理

    化学发光免疫禅友分析(chemiluminescence immunoassay,CLIA),是将具有高灵敏度的化学发光测定技术与高特异性的免枣历疫反应贺岩槐相结合,用于各种抗原、半抗原、抗体、激素、酶、脂肪酸、维生素和药物等的检测分析技术。是继放免分析、酶免分析、荧光免疫分析和时间分辨荧光免疫分析之后发展起来的一项最新免疫测定技术。

    化学发光免疫技术的基本原理

    化学发光是利用化学反应产生的能量促使产生能级跃迁,从而发光,典型的如鲁米诺检测血迹;

    荧光是一种光致发光现象,必须提供光源去激发分子产生能级跃迁,进而发光。

    使用上述两种方法进行免疫分析时,其区别配链很明显,化学发光无需外加光源,背景干扰小;而荧光则需要外加光源,在垂直光源的方向上检测,生物样品中的蛋白质、氨基酸等分子也会产仿轮生背景荧光,背景稍高一些,需要选择培大孙合适的荧光试剂,以及样品处理方法以减少非特异性吸附蛋白的影响。

    化学发光检测原理及流程

    化学发光的原理是,激发态的分子经过结合、光解和重新结合的化学反应,能量从激发态转变到燃和基态,从而发出光。

    关于化学发光检测原理,化学发光标记免疫分析又称化学发光免知手疫分析,是用化学发光剂直接标记抗原或抗体的免疫分析仪器。

    在这种反应中,激发态的分子可以通过自发荧光,吸收光能,再释放出大量的可见皮猛盯光来实现发光。

    当光子发出后,化学发光免疫分析仪器中核心探测器件也就是光电倍增管,由单光子检测并传输至放大器,并加高压电流放大,放大器将模拟电流转化为数字电流,数字电流将发光信号由R232数据线传输给电脑并加以计算,得出临床结果。

    而免疫反应是将发光物质直接标记在抗原(化学发光免疫分析) 或抗体(免疫化学发光分析)上或酶作用于发光底物。

    而关于免疫反应体系这里必须讲清楚,抗原抗体反应,这个里面是有未知和已知的关系,如果待测物是测抗原,则抗体是已经知道的,如果待测物是测抗体那抗原是已知的。

    而前面已经讲了化学发光现象,简单的讲就是光信号的强度和待测物浓度是成一定正比关系的,或者是可以通过,相关关系式换算出来的。

    生物发光免疫分析原理

    1、直接化学发光,标记尺型物为吖啶酯(雅培)或者abei(新产业)

    2、酶促化学发光,标记物为碱性磷酸酶(厦门波生)或者辣根过氧化物酶(强生)

    3、电化学发光,标记物燃轮为三联吡啶钌(罗氏陵段猜)

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