生物培养诊断法？实验室诊断 １．２．１ 普通营养琼脂平板，３７℃培养１８～２４ｈ，而后进行纯化培养。挑取分离培养的单菌落，进行革兰氏染色、镜检。用灭菌接种环勾取少许纯培养物接种于各种生化培养基中，３７℃培养１８～２４ｈ后观察结果。那么，生物培养诊断法？一起来了解一下吧。
诊断微生物学检查（1）病料采集：取病畜禽的组织，肝，肺，脾等体液、分泌物及局部病灶的渗出液。（2）镜检：对原始病料涂片进行革兰氏染色，镜检，应为革兰氏阴性。用印度墨汁等染料染色，可见清晰的荚膜。（3）培养：同时接种鲜血琼脂和麦康凯琼脂培养基，37℃培养24h，观察细菌的生长情况，菌落特征、溶血性，并染色镜检。（4）生化试验：多杀性巴氏杆菌在48h内可分解葡萄糖、果糖、单奶糖、蔗糖和甘露糖，产酸不产气。一般不发酵乳糖、山亏扮鼠李糖、菊糖、水杨苷和肌醇。可产生硫化氢，能形成靛基质，MR和V-P试验均为阴性。接触酶和氧化酶试验均为阳性。溶血性巴氏杆菌不产生靛基质，能发酵乳糖产酸。能发酵葡空磨萄糖、糖元、肌醇、麦芽糖、淀粉；不发酵侧金盏花醇、菊糖和赤藓醇。动物试验常用的试验动物有小鼠和家兔。实验动物死亡后立即剖检，并取心血和实质脏器分离和涂片染色镜检，见大量两极浓逗灶染的细菌即可确诊。血清型或生物型鉴定可用被动血凝试验、凝集试验鉴定多杀性巴氏杆菌荚膜血清群和血清型。用间接血凝试验测溶血性巴氏杆菌的血清型，根据生化反应鉴定该菌的生物型。（以上内容是我查到的资料，希望对你有所帮助！）
临床上疑似白喉的病人不必等待检验结果，应立即给予抗毒素和抗生素治疗。但对于白喉流行期的首例病人应做微生物学检验予以证实。
直接染色镜检
用棉拭采取假膜边缘部渗出物，涂片，用奈瑟氏染色或美兰染色，镜检有无含异染颗粒的棒状杆菌。结合临床症状，可作出初步诊断。确诊必须通过细菌培养并进行毒力试验旅搏。
凝固血清棉拭培养法
将沾有马或牛血清的棉拭子放在无菌试管内，经8～10磅蒸气灭菌20～30分钟，并使血清凝固，且此凝固血清棉拭采取病人咽部标本，置37℃培养8～10小时后，直接涂片镜检。此法可作为大量检查时快速培养诊断之用。
培养检查
将棉试检材接种于鸡蛋斜面或Loeffer''''s血清凝固斜面培养基及亚碲酸钾平板培养基上，置37℃培养，拆哪祥待斜面或平板上长出典型的灰色疑菌落，挑取转种到鸡蛋呀或血清斜面进行分离培养，以供进一步形态染色或毒力试验鉴定。
毒力试验
1．豚鼠试缓空验 取体重250g 豚鼠2只，其中一只试验前12小时，由腹腔注射白喉抗毒素250～500单位，供做对照。然后对照。然后各于皮下注射48小时的培养液2ml，若于2～4天注射抗毒素的豚鼠死亡，而对照豚鼠存活，便证明所试验菌株为有毒白喉杆菌。
疑似炭疽死亡动伍亏物的尸体，应尽快自末梢血管（耳尖、腔兆神尾尖等）采血，涂片染色镜检，取血后应立即用烙铁将创口烙焦，以止血封口。由于病尸体内的炭疽杆菌暴露于空气中，接触了氧，气温又不适宜其生长时，就会形成芽孢，所以尸体严禁剖检。
（1）涂片镜检取标本涂片进行革兰氏染色，发现有荚膜的呈竹节状排列的革兰氏阳性大杆菌，结合临床症状可作出初步诊断。陈旧病料可以看到“菌影”，确诊须做分离培养和动物接种。
（2）分离培猜坦养取病料接种普通琼脂或血液琼脂，37℃培养18-24h，观察有无典型的炭疽杆菌菌落，同时革兰氏染色镜检。
（3）动物试验将待检材料或培养物用生理盐水做适当稀释和磨匀后，皮下注射小鼠0、1-0、2ml,如为炭疽，多在18-24h因败血病死亡。剖检可见注射部位皮下胶样水肿，脾脏肿大。取脏器涂片镜检，如发现有荚膜竹节状大杆菌，可确诊。
（4）血清学试验常用炭疽环状沉淀试验（Ascoli氏反应）。方法是：在一支小玻璃管内把疑为炭疽病死亡动物尸体组织的浸出液与特异性炭疽沉淀素血清重叠，若二液接触面产生灰白色沉淀环，即可诊断。
实验室诊断
１．２．１
普通营养琼脂平板，３７℃培养１８～２４ｈ，而后进行纯化培养。挑取分离培养的单菌落，进行革兰氏染色、镜检。用灭菌接种环勾取少许纯培养物接种于各种生化培养基中，３７℃培养１８～２４ｈ后观察结果。将细菌纯培养物用无菌生理盐水洗下，稀释成３×１０１１个／ｍｌ的菌悬液，用无菌棉拭子蘸取稀释液均匀涂布于普通平板，经室温干燥３～５ｍ乎坦ｉｎ后，每块平板贴药敏纸片３片，３７℃培养１８～２４
２２．１坦顷烂
ｈ。
结果
剖检病变
剖检可见病鸡胸腔、腹腔内有大量
黄色干酪样渗出物；心包积液，心脏有纤维素性渗出物；肝脏肿大，表面瘀血，有纤维素性渗出物；肺脏瘀血，表面的纤维素性渗出物明显；气囊混浊、变厚；肾瘀血、质脆，一触即烂；脾脏瘀血。
２．２病理组织学变化镜下观察，可见肝脏有蛋白质纤维膜，肝细胞变性，窦状隙内红细胞增多，肝脏瘀血（图１）；肾脏病变比较严重，肾小管上皮细胞坏死，脱离基底膜，肾小管管腔内混有脱落的上皮细胞和渗出物（图２）；肺表面肺泡细胞塌陷，外有蛋白质纤维膜，肺血管内有大量红细胞聚集，肺瘀血
（图３）。
病理剖检对送检的２５只病死鸡进行了病
取病死鸡心、肝、脾、肺、
理剖检及大体病变的观察。１让漏．２．２组织病理学检查
肾等器官病健交界处部分组织块，置于１０％福尔马林中固定，经乙醇脱水后，二甲苯透明、浸蜡，将组织在ＢＭＪ一１生物组织包埋机下包埋成石蜡块，用ＡＯ一８２５０型组织切片机切片，厚度为５肛ｍ，ＨＥ染色，显微镜观察并照相。
病原微生物种类繁多，变异迅速，快速鉴定病原微生物的检验技术也在不断发展前进着。目前，应用比较广泛的病原微生物检测方法主要有直接涂片镜检、分离培养、生化反应、血清学反应、核酸分子杂交、基因芯片、多聚酶链反应等，该文对这些检测技术进展做一综述。 对人和动物具有致病性的微生物称为病原微生物，又称病原体，有病毒、细菌、立克次体、支原体、衣原体、螺旋体、真菌、放线菌、朊粒等。这些病原微生物可引起感染、过敏、肿瘤、痴呆等疾病，也是危害食品安全的主要因素之一。近年来出现的SARS、高致病性禽流感、西尼罗病毒感染等疾病的传染性极强，往往造成世界性大流行，因此对病原体的检测必须做到快速、准确。常规病原学检测方法操作繁琐，检测周期长，而且对操作人员技术水平要求比较高。随着医学微生物学研究技术的不断发展，病原学诊断已不再局限于病原体水平，深入到分子水平、基因水平的检测手段不断出现并被应用于临床和实验室 J。核酸分子杂交毁握技术、PCR技术、基因芯片技术等检测方法，自动化程度高，快速省时、无污染、结果精确，可以准确灵敏地鉴定病原微生物。1 传统的病原微生物的检测方法传统的病原微生物学实验室检查以染色、培养、生化鉴定等为主，将标本直接涂片染色镜检和接种在培养基上进行分离培养是对细菌或真菌感染性疾病进行病原学诊断的常用方法。
以上就是生物培养诊断法的全部内容，选择培养一般是通过观察微生物的同化作用类型或某一特征进行间接判断，得到的微生物往往并不只有一种，但是能够大致确定这些微生物存在的共有特征从而对其分类。使用鉴别培养基。即根据微生物的代谢特点。
