微生物限度检查法？供试品检查时，如果使用了表面活性剂、中和剂或灭活剂，应证明其有效性及对微生物无毒性，除另有规定外，本检查法中细菌及控制菌培养温度为30℃～35℃；霉菌、酵母菌培养温度为23℃～28℃。检验结果以1g、1ml、10g、10ml、10c㎡ 为单位报告，特殊品种可以最小包装单位报告。那么，微生物限度检查法？一起来了解一下吧。
微生物限度检查法是一个在药品、食品和化妆品行业中广泛使用的质量控制方法，旨在检测样品中的微生物数量和类型。本文将详细阐述微生物限度检查法的判定准则、计数方法验证以及控制菌检查方法的验证过程。
在判定微生物限度时，首先需要比较被检培养基上的菌落平均数与对照培养基上的菌落平均数的比值。如果比值大于70%，且菌落的形态和大小与对照培养基上的一致，那么可以判定该培养基的适用性检查符合规定。这一标准确保了培养基能够准确反映样品中的微生物情况。
为了确保微生物计数方法的准确性和适用性，在建立产品的微生物限度检查法时，应进行细菌、霉菌及酵母菌计数方法的验证。验证时，至少需要进行3次独立的平行试验，并计算各试验菌的回收率。具体操作包括使用平皿法和薄膜过滤法进行菌落计数，同时制备菌液组、供试品对照组和稀释剂对照组，以考察供试液制备过程中的微生物影响。
在试验过程中，需要对各试验菌的回收率进行逐一验证，确保方法的准确性和可靠性。当验证试验结果显示稀释剂对照组的菌回收率不低于70%，且试验组的菌回收率均不低于70%时，可以使用该供试液制备方法和计数法对供试品进行细菌、霉菌及酵母菌数的测定。若试验中任一次菌回收率低于70%，则需要采用其他方法如培养基稀释法、离心沉淀法等消除供试品的抑菌活性，并重新进行方法验证。
在微生物限度检查法中，检验量指的是用于一次试验的供试品量，通常包括g、ml 或c㎡。一般情况下，供试品的检验量定为10g 或10ml；膜剂则为100c㎡。针对贵重药品或微量包装药品，检验量可适当减少。若需检测沙门菌的供试品，其检验量需增加至20g 或20ml（其中10g或10ml 用于阳性对照试验）。
在进行试验时，应从至少2个以上最小包装单位中抽取供试品。对于大蜜丸，至少抽取4丸；而膜剂则至少抽取4片。通常，应随机抽取的供试品量应至少为检验用量（两个以上最小包装单位）的3倍。
供试液的制备应根据供试品的理化特性与生物学特性，采取适宜的方法。若需加热，应均匀加热且温度不超过45℃。从制备至加入检验用培养基，供试液不得超过1小时。通常，供试液的制备方法包括：
1. 对于液体供试品，取10ml供试品，加pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液至100ml，混匀，作为1:10的供试液。对于油剂，可加入适量的无菌聚山梨酯80以使供试品分散均匀。水溶性液体制剂亦可直接使用混合的供试品原液作为供试液。
2. 对于固体、半固体或黏稠性供试品，取10g供试品，加pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液至100ml，使用匀浆仪或其他适宜的方法混匀，作为1:10的供试液。
在环境洁净度10000级下的局部洁净度100 级的单向流空气区域内进行。检验全过程必须严格遵含链守无菌操作，防止再污染。单向流空气区域、工作台面及环境应定期按《医药工业洁净室（区）悬浮粒子、浮游菌和沉降菌的测试方法》的现行国家标准进行洁净度验证。
供试品检查时，如果使用了表面活性剂、中和剂或灭活剂，应证明其有效性及对微生物无毒性，除另有规定外，本检查法中细菌及控制菌培养温度为30℃～35℃；霉菌、酵母菌培养温度为23℃～28℃。检验结果以1g、1ml、10g、10ml、10c㎡ 为单位报告，特殊品种可以最小包装单位报告。
扩展资料：
注意事项：
过滤杯采用独特的唇形密封设计，不使用夹钳和O型圈，确保无泄漏操作和均匀的微生物回收率。
滤膜预先灭菌,即竖老拆即用，可将主要污染物源降低,提高检测可靠性。余老升
直接抽滤排液,无需抽滤瓶，安装使用方便，内置隔膜液泵，效率更高。
三联过滤头设计，可同时抽滤，提高工作效率，每个滤头也可独立控制，方便操作人员灵活使用。
参考资料来源：百度百科-微生物限度检查法
非无菌药品的微生物限度标准是基于药品的给药途径及对患者健康潜在的危害而制订的。药品的生产、贮存、销售过程中的检验，原料及辅料的检验，新药标准制订，进口药品标准复核，考察药品质量及仲裁等，除另有规定外，其微生物限度均以本标准为依据。 细菌数每1g不得过l000cfu。每lml不得过100cfu。
霉菌和酵母菌数每lg或lml不得过100cfu。
大肠埃希菌每渣虚1g或lml不得检出. 3.1用于手术、烧伤及严重创伤的局部给药制剂应符合无菌检查法规定。
3.2耳、鼻及呼吸道吸入给药制剂
细菌数每1g、lml或l0cm²，不得过100cfu。
霉菌和酵母菌数每1g、lml或l0cm²，不得过10cfu。
金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌每1g、lml或l0cm²不得检出。
大肠埃希菌鼻及呼吸道给药的制剂，每1g、lml或l0cm²，不得检出。
3.3阴道、尿道给药制剂
细菌数每1g、lml或l0cm²，不得过100cfu。
霉菌数和酵母册团菌数每1g、lml或l0cm²应小于10cfu。
金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、白色念珠菌每1g、lml或l0cm²，不得如姿燃检出。
3 .4直肠给药制剂
细菌数每1g不得过l000cfu。
滤膜法是国际公认的微生物大改首标准检验方法，广泛应用于多个领域，如环境监测、食品及饮料工业、化妆品、制药工业品质控制和电子工业。它通过使用具有适当孔径的滤膜，过滤样品，将微生物保留在膜表面。滤膜法具有显著优势，相较于直接法，能够检测大量样品，提高检歼丛测准确性，滤膜上培养出的菌落作为永久记录，菌落与样品量直接对应，得出定量结果。操作步骤包括：将200ml纯化水通过滤膜，将滚数滤膜浸泡在灭菌生理盐水中，再接种至不同稀释倍数的细菌、霉菌和酵母菌培养皿。此方法简化了微生物检测程序，高效、实用，成为现代微生物检测的首选方法。
以上就是微生物限度检查法的全部内容，微生物限度检查法是一个在药品、食品和化妆品行业中广泛使用的质量控制方法，旨在检测样品中的微生物数量和类型。本文将详细阐述微生物限度检查法的判定准则、计数方法验证以及控制菌检查方法的验证过程。在判定微生物限度时，首先需要比较被检培养基上的菌落平均数与对照培养基上的菌落平均数的比值。
